1장 실험제목
2장 목적
3장 이론
4장 실험방법
5장 결과
6장 결론
7장 토론문제 풀이 및 HOMEWORK
1.실험제목 : 아미노산의 페이퍼크로마토그래피
2.목적 : 생물체의 생체내 중요 분자인 아미노산을 분리하는 방법을 알아본다.
3.이론
아미노산(amino acid)
한 분자안에 아미노기-nh2와 카르복시기-cooh를 가지는 유기화합물의 총칭 단백질을 완전 히 가수분해하면 암모니아와 유리 아미노산이 생성되는데, 아마노산은 모든 생명현상을 관장 하고있는 단백질의 기본 구성단위이다 단백질에서 분리된 아미노산은 대개 아미노기와 카르복 시기가 같은 탄소원자에 결합하여 r-chnh2의 일반식으로 나타낼 수 있는 α아미노산 γ아미노 산 δ아미노산이다 cr은 지방족,방향족,헨테로고리의 치환기를 나타낸ㄴ다.이밖에 아미노기 가 차례로 이웃하는 탄소원자로 옮겨가에 따라 β-아미노산 γ-아미노산 δ-아미노산등으로 부른 다.흔히 아미노산은 α아미노산을 가르킨다
맨처음 발견된 아미노산은 아스파라긴으로 1806년 프랑승 과학자 보클랭과 로바케가 아스파라 거스의 싹에서 새로운 결정을 분리시켜, 이것을 아스파라긴으로 명명하였다. 단백질의 가수분 해물에서 처음으로 아미노산을 분리시킨 사람은 브라코노인데, 그는 1802년 아교, 고기, 양털 등을 황산분해하여, 이교로부터는 굴리신을, 고기와 양털로부터는 류신을 단리시켰다
그후 1935년에 있는 wc로즈의 트레오신 발견을 이르기까지 약 100년에 걸쳐 22종의 주요 아미노산 이 발견되었다. 이밖에 자연계로부터는 펩티도와 특수한 단백질의 구성성분으로서 각종 아미 노산이 발견되어, 그수는 약 80종 이상에 이르고 있다
4.실험방법
① 길이 40㎝ 폭㎝이상되는 여과지 2장을 준비하고 여과지 하단40㎝되는 장소에 연필로 가볍 게 줄을 긋는다.
② 아미노산 표준대조액과 시료를 모세관에 찍어서 금위에 1.2㎝간격으로 스포트한다.스포트 의 지름은 1㎜ 이내로 하는 것이 좋다.대게 한번만 찍어도 되지만 시료가 묽으면 건조시 켜가면서 xxx-xxx번 반복하여 찍는다.
③ 충분히 건조되었으면 페놀, 물욤매나 부탄욜, 초산, 물용매를 각각 1㎝정도의 깊이로 넣은
전개병 속에 여과지를 세워서 크로마토그래피를 행한다.
④ 용매가 약30㎝까지 올라가면 여과지를 꺼내 통풍이 좋은 것에 걸어두고 건조시킨다.
⑤ 페롱은 20℃이하의 온도에서는 건조되기 어려기 때문에 60℃정도의 건조기에 넣고 건조시 킨다.
⑥ 용매의 냄새가 없어지면 여과지 전체에 발색제로 0.2% 닌히드린 용매를 분무해주고 90℃의
건조기에 넣고 건조시키면 좋다.
⑦ 여과지 위에는 아미노산의 자색반점이 검출될 것이다.닌히드린에 대한 각 아미노산의 발 색 반응은 표 xxx-xxx을 참조한다.
⑧ 모든 종류의 아미노산을 동시에 일차원 페이퍼크로마토그래피로 동정하는 것은 매우 어렵
기 때문에, 이온교활 수지 페이퍼크로마토그래피로써 각 아미노산을 분리한 후에 분화된 액에 각각 일차원 페이퍼크로마토그래피를 행하거나, 또는 2차원 페이퍼크로마토그래피를 행하여 완전히 분리시킬 수 있다.
5.결과
아미노산의 종류 아미노산의 이동거리 아미노산 반전의 색깔 알라닌 66㎜ 자색 발린 90㎜ 자색 로이신 117㎜ 자색
* rf값 0.xxxx.xx.xx 0.66
용매의 이동거리 178㎜ rf 값 아미노산의 이동거리 / 용매의 이동거리
6.결론
각 반응에 따라 나타나는 색들이 아름다웠고, 또 한가지 방법만이 아닌 여러 방법으로 단백질 을 볼수 있다고 느꼈으며 아미노산은 여러 종류이며 그 마다 특성이 다르다.
7.토론문제 풀이 및 homework
① 필수아미노산에는 어떤 것들이 있는가? (이하 생략)
